超氧化物歧化酶测定方法

超氧化物歧化酶（SOD）是人体中一种重要的抗氧化酶，能有效清除自由基，保护细胞免受氧化损伤。针对SOD的测定方法有很多，下面我们将对常用的两种方法进行介绍。

方法一：氮氧自由基法

氮氧自由基法是一种简便而灵敏的超氧化物歧化酶测定方法。具体步骤如下：

准备好反应液。将0.1M的碳酸氢钠溶液pH调整至6.5，加入0.05ml呋喃-β-二酮（NBT）溶液（1mg/ml），同时加入0.05ml乙酸铵缓冲液（0.1M，pH=5.5）和0.05ml过氧化氢（H2O2）溶液（1mg/ml），混合均匀后即为反应液。
将反应液分为多个试管，每个试管加入不同浓度的SOD标准品和待测物，混合均匀后置于37℃水浴中孵育10min。
孵育结束后立即放入冰水中，加入1ml碳酸氢钠洗涤液（0.1M，pH=10.6）溶解反应产物。
用分光光度计测定洗涤液的吸光度，并利用标准曲线计算出待测物中SOD的活力。

该方法操作简便，结果准确可靠，适用于大多数样品的测定。

X射线法是一种较为复杂但准确度更高的超氧化物歧化酶测定方法。具体步骤如下：

制备样品溶液。将待测物和0.04M甘氨酸缓冲液（pH=7.8）混合，摇匀后放置于4℃条件下保存。
制备样品加工液。将上述样品溶液加入相等体积的无水乙醇，并加入适量金属离子（如铁/铜），再加入适量过氧化氢，将混合液反复冷却-加热，使之产生自由基，形成固体物质。
用X射线光学仪器对其进行测定，并用激光荧光等方法进行分析，得出样品中SOD的浓度。